近年来,帕金森病(Parkinson’s Disease, PD)患病率在全球范围内呈上升趋势,该疾病早期诊断率低,且尚无治愈的办法,临床上主要通过药物或手术治疗的方法控制症状,保证患者的日常生活。
为了提高寻找提高早期诊断率及开发新的治疗方法,对疾病发病机制的认识尤为重要。目前关于PD的病因及发病机制并不十分清楚,现如今达成共识的学说主要包括氧化应激、神经炎症、线粒体功能障碍、铁代谢等,其中氧化应激是近年来的研究热点。
437必赢会员中心第三附属医院邢红霞教授团队先前发现在PD患者血浆中的抗氧化酶——过氧化还原酶-2(Peroxiredoxin-2, Prdx-2)的含量明显下降,近日该团队在Neurochemical Research上发表的题为“The study of Overexpression of Peroxiredoxin-2 Reduces MPP+-Induced Toxicity in the Cell Model of Parkinson’s Disease”的研究进一步探讨了Prdx-2在PD体外模型中的保护作用,并初步探究其作用机制。该研究结果可能为PD早期诊断及新的治疗方法的开发提供参考。
该团队使用SH-SY5Y细胞构建PD体外模型,检测细胞活性、活性氧含量、线粒体膜电位、蛋白印迹技术检测酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)、Prdx-2、沉默信息调节因子1(silent information regulator of transcription 1,SIRT1)及凋亡相关的Bax、Bcl-2蛋白表达量,结果显示在PD体外模型中确实存在氧化应激和抗氧化酶的下降。
图1 不同MPP+作用下活性氧含量及细胞活性的变化
图2 不同MPP+作用下线粒体膜电位的变化
图3 蛋白印迹检测目标蛋白的变化
此外,该团队进一步使用细胞转染技术将Prdx-2进行过表达,同时设置阴性转染组,比较正常细胞组、MPP+组、过表达组、阴性转染组四组之间活性氧含量、细胞活性及目标蛋白的变化情况。
结果显示Prdx-2含量的增加可以减少PD体外模型中活性氧含量的聚集、增加细胞活性。并且发现了Prdx-2含量变化可以影响SIRT1的表达,在过表达Prdx-2组,SIRT1的含量也明显增加,这提示我们Prdx-2可能通过SIRT1相关通路发挥保护作用。
图4 RT-qPCR检测Prdx-2过表达情况及四组之间活性氧含量检测
图5 四组之间目标蛋白含量变化
文章结论与展望
该研究使用PD体外模型及基因过表达技术证实了氧化应激是PD的发病机制之一,揭示了抗氧化酶Prdx-2对PD模型的保护作用,并初步探索到Prdx-2可能影响SIRT1相关通路。可能为PD在氧化应激方面的诊断标志物及治疗方法的开发提供方向。
参考文献
1.陈曼, 何开武, 任晓虎, et al. 帕金森病患者血浆蛋白质组学的初步分析及鉴定 [J]. 437必赢会员中心学报, 2018, 35(05): 378-81
2.Liu M, Zuo S, Guo X, et al. The Study of Overexpression of Peroxiredoxin-2 Reduces MPP+-Induced Toxicity in the Cell Model of Parkinson's Disease. Neurochem Res. 2023;48(7):2129-2137. (IF=4.414)
【作者介绍】
刘梦豪 437必赢会员中心第一临床学院2020级硕士研究生
研究生导师:437必赢会员中心第三附属医院邢红霞教授
研究方向:神经变性疾病基础与临床研究